内容概要
在多参数流式细胞术与多色荧光成像实验中,FITC、PE 等可见光通道常被免疫表型标记、功能蛋白检测占用,传统绿色通道凋亡试剂难以适配复杂的多色实验设计,且补偿调节难度大、易出现信号串扰。Abbkine Annexin V-APC/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒(货号 KTA0007)采用远红光 APC 荧光标记 Annexin V,搭配 7-AAD 作为死细胞核酸染料,光谱位于自发荧光极低的远红光区间,与常用可见光通道串扰极小,完美适配多色流式 panel。试剂盒配套专属凋亡阳性对照,解决补偿调节与体系验证难题;一步法染色仅需 15 分钟即可完成,细胞分群边界清晰、数据准确性高,同时支持流式细胞仪定量与荧光显微镜成像,是多参数复杂实验体系下凋亡检测的理想解决方案。

产品介绍
Abbkine KTA0007 试剂盒是专为多色检测场景优化的凋亡双染试剂,核心组分包括 5×Annexin V 结合缓冲液、Annexin V-APC 荧光探针、7-AAD 核酸染料以及凋亡阳性对照溶液,规格为 50 次检测,采用蓝冰冷链运输,4℃避光环境下可稳定保存 12 个月。
该产品适配贴壁细胞与悬浮细胞两类样本,针对流式细胞术的补偿调节与分群效果进行了专项配方优化,同时兼容荧光显微镜成像观察。其中 Annexin V-APC 匹配常规流式 APC 检测通道,7-AAD 可通过 PerCP 通道检测,无需额外调试激光器与通道参数即可直接使用。试剂盒特别配制的凋亡阳性对照可直接用于补偿调节与体系验证,无需研究者自行摸索凋亡诱导条件,有效降低了多色凋亡实验的操作门槛。
检测原理
细胞凋亡早期,细胞膜磷脂双分子层的不对称性被打破,原本定位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)翻转至细胞外表面,这是凋亡启动后最早出现的膜结构标志之一。Annexin V 是一种分子量 35-36 kDa 的钙离子依赖性磷脂结合蛋白,对 PS 具有高度特异性亲和力,标记 APC 荧光基团的 Annexin V 可与外翻的 PS 结合,从而标记早期凋亡细胞。
7-AAD 是一种膜不通透性核酸染料,无法穿透完整的活细胞与早期凋亡细胞膜,仅能进入细胞膜破损的晚期凋亡细胞与坏死细胞,嵌入核酸后发出近红色荧光。二者联合使用可将细胞清晰分为三个群体:双阴性为活细胞,Annexin V-APC 单阳性为早期凋亡细胞,双阳性为晚期凋亡或坏死细胞。试剂盒配套的阳性对照为标准化凋亡细胞样本,可用于快速调节荧光补偿、验证试剂有效性,确保实验结果真实可信。
产品优势
其一,远红光通道适配多色实验。APC 荧光光谱位于远红光区间,与 FITC、PE 等常用可见光荧光基团光谱重叠度极低,多色共染时串扰极小,可轻松融入多参数流式检测 panel,在检测免疫表型、蛋白表达的同时同步完成凋亡分析,大幅提升单样本的信息获取量。
其二,自带阳性对照,质控体系完善。专属凋亡阳性对照溶液可直接用于荧光补偿调节与实验体系验证,解决了多色流式中补偿调节难、凋亡对照制备繁琐的痛点;既可以排查试剂失效、操作失误等问题,也能满足学术论文发表的质控要求,提升数据说服力。
其三,一步法快速染色,操作简便。采用活细胞直接染色方案,无需固定、无需破膜,只需将细胞与染料在结合缓冲液中共同孵育 15 分钟即可完成染色,全程操作步骤少、实验周期短,有效降低多步操作带来的样本损伤与数据误差。
其四,细胞分群优异,数据准确性高。经过配方优化的染色体系有效降低了非特异性结合,活细胞背景干净,早期凋亡、晚期凋亡与活细胞群边界清晰、分离度高,能够显著提升凋亡定量的精确度,批内与批间实验结果的重复性更优异。
应用领域
在肿瘤免疫研究中,该试剂盒可与 T 细胞、巨噬细胞等免疫细胞的表面标记抗体搭配,同时分析肿瘤微环境中不同免疫细胞亚群的凋亡水平,解析免疫逃逸与免疫耗竭的机制,评估免疫治疗药物的作用效果。
在多参数药物筛选中,可结合细胞周期、表面标志物等多个检测指标,在同一样本中同步完成凋亡检测,提高样本利用率,适合高通量化合物库的多维度活性评价。
在细胞制剂质量控制中,可用于 CAR-T 细胞、干细胞、免疫细胞制剂的凋亡与活率检测,结合细胞表型标记完成多维度质量评价,保障细胞治疗产品的质量稳定。
在多色荧光成像研究中,远红光凋亡标记可与 GFP 报告基因、FITC 标记抗体等绿色荧光体系联合开展共定位实验,无明显通道串色,直观展示目标蛋白表达与细胞凋亡的空间关联。
总结
Abbkine Annexin V-APC/7-AAD 细胞凋亡检测试剂盒 KTA0007 以远红光 APC 通道为核心特色,完美适配多色流式与多标成像实验,搭配完善的阳性对照体系与优异的细胞分群效果,兼具低串扰、快操作、高准确的多重优势,能够为复杂多参数实验体系下的凋亡检测提供稳定可靠的解决方案,助力免疫、肿瘤、药理等领域的科研工作深入开展。

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